2×Lab FL PCR Master Mix

產品貨號：FL0201

儲存條件：-20°C 保存2年。短時間（1個月內）使用可以置4°C。

產品說明

本產品包含Lab LastLong DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液，濃度為2×。 使用時只需加入模板、引物，并補足水至Mix終濃度為1×即可。本制品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳；也可經過純化處理，以用于酶切、連接、熒光測序等后續操作。PCR產物為3，端帶A頭，純化后可直接用LABLEAD LabpO TOPO TA系列載體（貨號：PA0101、PA0102）克隆。

產品特點

1、超快的擴增速度：延伸速度可以達到5-10sec/kb，最短半小時完成PCR。

2、突出的長片段擴增能力：可擴增高達10kb的長片段（包括人類基因組此類的復雜模板）。

3、良好保真性：保真度是taq的3倍以上。

4、強大的擴增能力：產量高，對于一些有特殊結構的復雜模板和GC含量高模板有良好效果。

建議PCR 體系設置

參考模板用量（50 μl反應體系）

質粒：0.1-10ng；細菌基因組：10-100ng；人類基因組：50-150ng；cDNA：1-5μl from RT reaction。

建議PCR循環條件

注意事項

1.本品擴增速度極快， 質粒和簡單基因組等簡單模板可以嘗試5s/kb延伸速度并采用減少循環數以進一步縮短PCR時間；長片段（大于等于3kb）或者復雜模板產量較低應采用15-20s/kb延伸速度或者采用較多循環數。

2.Lab FL產量較低時可嘗試采用較長的延伸時間（如20s/kb）和循環數（如35個）可以提高產物產量。

3.對于GC含量很高的模板，短片段預變性和變性溫度可以提高到98 ^oC和/或適當延長變性時間。長片段為了避免DNA損傷不應該提高變性溫度，應該適當延長預變性時間到5min.，變性時間可以延長5-10s。

4.如果擴增模板GC含量高或者模板復雜擴增效果不佳時，可在反應混合物中加入DMSO到終濃度1%-8%，按照1%梯度增加摸索best濃度。或者加入甜菜堿至終濃度1.0-1.7 M。并采用降落PCR（Touchdown PCR）