Firefly Luciferase Assay Kit（螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒）

貨號：DR024-100T

儲存條件

-80℃保存。螢火蟲螢光素酶檢測液（B+C）混合液不可反 復凍融，建議進行小批量分裝，并于-20℃（最長可儲存1個月）或-80℃（最長可儲存 1 年）條件下儲存。

產品介紹

真核基因表達調控研究常用的方法是進行報告基因的檢測，生物發光法又是報告基因檢測zui常用的有效手段。螢光素酶能催化底物螢光素的轉化，并發射出光子。該產品為螢火蟲螢光素酶報告基因在哺乳動物細胞中的表達提供快速、靈敏、穩定的檢測方法。能夠檢測最di 10-20 mol 的螢光素酶，在 10-14 至 10-20 mol 的酶濃度范圍內呈很好的線性關系。

產品優點

1. 快速：細胞裂解在 10-15 min 內完成。

2. 方便：試劑易于配制，樣品檢測步驟簡單。

3. 靈敏：能夠檢測最di10-20 mol 的螢光素酶。

4. 酶的濃度線性范圍可達 8 個數量級。

使用方法

1. 細胞裂解

（1）將轉入報告基因的細胞中的培養基移除，加 PBS 輕輕洗滌（貼壁細胞可直接進行此操作，懸浮細胞要離心收集細胞）。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用無菌水按 4:1 稀釋A 組分)，然后將培養板放在微型震蕩器上室溫震蕩 15 min，充分裂解細胞。

注：裂解產物可室溫保存 6 h，-70℃可長期存放（裂解產物不能多次反復凍融）。

（2）將充分裂解后的裂解產物，10000-15000 rpm 離心 3-5min。離心后將上清液移入新的 EP 管中進行后續檢測。

2. 螢光素酶檢測

（1）按照儀器說明書將熒光測定儀打開，設定參數，測定時間為 10 s，測定間隔為 2 s。

（2）將細胞裂解產物按照 20~100 µL 的體積加入測量管中（保持每次樣品量一致），另外加入 100 µL 螢火蟲螢光素酶檢測液，充分混勻后測定 RLU（Relative light unit）。

注：螢火蟲螢光素酶檢測液不能反復凍融，若單次實驗用量較少，建議按照單次使用量分裝成小規格。

注意事項

1. 溫度會對酶的活性產生影響，因此所有試劑應放置室溫后再使用。

2. 如果單管熒光測定儀測定，每個樣品與測定試劑混合后到測定前的時間應保持一致。

3. 螢火蟲螢光素酶催化的生物發光的zui強波長為 560 nm。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5. 本產品僅用于科研。