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無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)

更新時(shí)間:2025-12-13點(diǎn)擊次數(shù):32
  無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)多以細(xì)胞裂解液為基礎(chǔ),去除基因組DNA、RNA和蛋白質(zhì),保留轉(zhuǎn)錄和翻譯必需的組分,再添加入含有能量系統(tǒng)、氨基酸等底物的緩沖液系統(tǒng)。用戶加入自己的目的基因,在一定溫度下孵育或恒溫振蕩一定時(shí)間即可完成蛋白的表達(dá)。
 
  通常包含細(xì)胞提取物(如大腸桿菌裂解液、小麥胚芽提取物、昆蟲細(xì)胞裂解液等,提供轉(zhuǎn)錄和翻譯所需的酶、核糖體等成分)、能量源(如ATP、GTP等)、氨基酸、輔因子、緩沖液系統(tǒng),部分試劑盒還會(huì)提供線性模板、質(zhì)粒載體、分子伴侶、氧化還原緩沖液等特殊組分。
 
  無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)勢(shì):
 
  快速高效:無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)完成DNA到蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換,相較于細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)系統(tǒng)效率提高數(shù)倍以上。例如,某些試劑盒能在2 - 16小時(shí)內(nèi)完成蛋白表達(dá)。
 
  靈活性高:研究人員可以輕松修改反應(yīng)條件,如溫度、pH值和代謝物濃度,以優(yōu)化蛋白質(zhì)的表達(dá)和折疊;還能根據(jù)需求添加蛋白酶抑制劑、稀有密碼子、金屬離子等添加劑,或進(jìn)行tRNA修飾和氨基酸標(biāo)記等。
 
  安全性好:由于不涉及活細(xì)胞,無(wú)細(xì)胞蛋白合成減少了病原體污染的風(fēng)險(xiǎn),特別是在生產(chǎn)疫苗和治療性蛋白質(zhì)時(shí)。
 
  可表達(dá)特殊蛋白:能表達(dá)在細(xì)胞內(nèi)難以表達(dá)的蛋白,如膜蛋白、毒性蛋白、二硫鍵依賴性蛋白等。
 
  高通量篩選:可以同時(shí)合成多個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì),用于快速篩選和表達(dá)大量不同蛋白質(zhì),加快蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等過(guò)程。
 
  成本效益:與細(xì)胞培養(yǎng)相比,無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)可以顯著降低某些蛋白合成的成本,特別是在高經(jīng)濟(jì)附加值的蛋白生產(chǎn)和篩選中。